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TPA精製プロトコル

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組織プラスミノーゲン活性化因子またはTPAは血栓を破壊することができる蛋白質であるセリンプロテアーゼの一種である。
TPAは、内部の血管を覆う細胞で見出される。 TPAプロトコルはストローク上の医薬品および医学研究の一部、並びに肺塞栓症および心筋梗塞などの心臓と肺疾患である。 TPAの精製はクロマトグラフィーおよび電気泳動を含む一連のプロセスを通じて、他の分子から、このタンパク質の分離を指します。 TPAの精製豚腎臓
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からこのプロトコルは、線維素溶解の研究に使用され、腫瘍の形成に関連するフィブリンと呼ばれる凝固の積を、破壊のプロセス。技術者は、pH 4で、酢酸カリウム緩衝液でアセトン乾燥豚の腎臓からTPAを抽出します。

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次いで、これらの細胞は細胞沈殿を誘導するために硫酸アンモニウムを追加する。そして、彼らはクロマトグラフで分析されるサンプルにn-ブチル-セファロースを追加します。コンカナバリンも追加し、クロマトグラフされています。異なるタンパク質を分離するyが行われる。チャイニーズハムスター卵巣および大腸菌細胞
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プロテイン純度からTPAの買取精製は、生物学的な実験の成功の重要な要因である。精製されたTPAは、このように時間を節約し、不十分な精製された溶液に起因する実験を危険にさらす危険性を回避することもまた、市販されている。
このプロトコルは、哺乳動物と細菌細胞におけるTPAの浄化プロセスが含まれます。技術者は、細胞サンプル、ろ液を沈殿させ、それらと親和性およびゲルクロマトグラフィー分析を行う。その後、彼らは商業生産に先立って、結果を分析し、比較する。クロマトグラフで分析し、セファロースカラムで洗浄 - 大腸菌
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明確化細胞溶解物における活性なヒトTPAの買取式はリジンに追加されます塩素酸ナトリウムの溶液。別のサンプルは、非常に高い親和性でTPAに結合するタンパク質を含有する第二クロマトグラフィーカラムにロードされる。 2列目のサンプルは、亜鉛 - セファロースの溶液と混合する。
得られたタンパク質は、ジャーナルによると、90%以上の純度を示す "応用環境微生物学。"
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