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通常の細菌を染色するには、スライドに約1分間液体染色を施した後、水ですすいでください。異なる染色は、同じスライド内の2つの異なる細菌に対して異なる染色を使用する。例えば、グラム染色では、まずスライドをクリスタルバイオレットとヨウ素で染色し、次にアルコールで脱色する。
グラム陽性である細胞は、アルコールを使用した後でさえ、最初の染色の暗紫色を保持するが、グラム陰性細胞は無色に戻る。次に、ピンクのような対照的な色で2回目の染色を行い、グラム陽性細胞が元の染色を保持している間にグラム陰性細胞がピンク色に変わる。 br>
細菌の中には脂質でできた厚い細胞壁があり、脂肪のビルディングブロックがあり、それらはワックス状でほぼ防水性になっています。これは、正常な染色が細胞に浸透することができないことを意味する。
1880年代には、結核を引き起こす細菌であるマイコバクテリウム・ツベルクローシス（Mycobacterium tuberculosis）を研究しようとしていました。しかし、それが24時間まで染色に浸さなければ、それは通常のグラム染色を保持しないであろう。梅毒に対して有効な最初の薬剤を後に開発したポール・エールリッヒは、細菌への染色を強制する酸素早い染色を開発しました。 Ehrlichの方法は45分しかかかりませんでしたが、現代の酸染色法はわずか5分で完了しました。
染料を強制的に使用するには、通常carbol-fuchsinバクテリアに5分間沸騰させたビーカーで加熱しなければならないが、スライドには常に汚れが詰まり、乾燥しないようにする必要がある。加熱する別の方法は、加熱する必要がない改変Kinyoun carbol fuchsinステインを使用することですが、スライドが汚れに5分間浸漬しても乾燥しないことが不可欠です。いずれの一次染色法を用いても、スライドは酸性アルコール（通常のアルコールではない）で脱色され、存在し得る他の細菌を示すために異なる色の二次対比染色で染色される。
マイコバクテリウム・ツベルクローシス（Mycobacterium tuberculosis）は非常に危険であり、病院や臨床でのみ検査されています別個の部屋を有する施設または汚染を防ぐために特別に設計された移送フード。学術研究室で使用することは違法です。代わりにMycobacterium smegmatisが使用されますが、結核菌よりもはるかに細胞壁が薄いため、誤って脱色して一次染色を除去する方が簡単です。
手順上の注意
Carbol-fuchsinのフュームは有毒ですので、フュームフードを使用してヒュームを入れ、外部に排出させてください。
また、ヒーティングスライドの危険性を避けるために、代わりにKinyoun carbol fuchsinを使用することができます。フェノールとフクシンの濃度が高く、細菌に浸透するために加熱する必要はありません。 >
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