寒天プレートの準備方法

分子生物学および細菌学は、実験のために細菌などの微生物を培養するために寒天プレートを使用する。
寒天は、生存および成長するために微生物が必要とする液体栄養培地を凝固またはゲル化させる薬剤である。一度寒天プレートに移すと、細菌は異なるコロニー（低濃度で増殖する場合）またはスメア（高濃度で増殖する場合）に成長し、分析のために採取することができる。生物学者は、寒天プレートを調製します。このプロセスでは、実験室グレードの試薬や機械にアクセスし、分子生物学や無菌技術を十分に理解する必要があります。
必要なもの
手袋
ラボコート
フェイスマスク
ブンゼンバーナー
ラミナフローフード
無菌ペトリ皿
10gバクトトリプトン
5g酵母エキス
15gアガロース
1N NaOH 1mL
滅菌蒸留水
ガラス瓶
オートクレーブテープ
オートクレーブ - サプリメントアンピシリンなどの抗生物質

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1

手袋、ラボコート、フェイスマスクなどの適切な保護具を着用し、すべての表面を除菌します。ブンゼンバーナーまたは好ましくは滅菌済みの層流フードの隣で作業します。
これは、空気中の汚染物質が寒天に落ちるのを防ぎます。

2

梱包からペトリ皿のスタックを取り除きますが、寒天プレートを再パックするために保存してください。寒天の種類と調製日を皿の外面（蓋ではなく）に表示してください。蓋をはずして寒天を簡単に注ぎ出すようにプレートを一枚にします。

バクトトリプトン、酵母エキス、アガロースを一緒に混ぜて、水酸化ナトリウム（NaOH）溶液である。滅菌蒸留水を加えて1Lの栄養培地を得る。この溶液を少なくとも1.5L容量のガラス瓶に移す。ボトルのふたをゆっくりとねじ込み、準備の日付とメディア名を記入してください。
ボトルにオートクレーブテープのストリップを置き、25分間オートクレーブします。ボトルを摂氏45度以上に冷やしてください（または早すぎるように固めます）が、摂氏50度以下にしてください。冷却し凝固させた寒天のボトルを4℃で保存し、液化するまで暖めます。あなたの特定の実験やバクテリアのために必要な場合は、抗生物質などの適切なタイプと量のサプリメントを加えます。培地が熱すぎる場合、サプリメントは破壊されるので、進行する前に培地の温度を慎重に確認してください。

4

寒天培地を十分に注ぎ、まだ暖かく液化している。表面積が完全に覆われていることを確認します。
過剰量を注ぐか、寒天を皿の上に届かせないでください。ブンゼンバーナーまたは層流フードを連続的に作動させることによってプレートを滅菌雰囲気に保つ。プレートをセットしてふたを取り替える。

5

寒天プレートを37℃以下のオーブンで約30分〜1時間乾燥する。あるいは、層流フード内で3分間放置するか、1日または2日間のドラフトのない交通量の少ない地域の汚染除去された実験台で放置することができます。プレートを乾燥させると、寒天表面に置かれた細菌溶液は、寒天に付着したコロニーを形成する代わりに、単に希釈して滑り落ちるのを止めます。

摂氏温度。
乾燥した寒天プレートを底部に積み重ねると、ラベルがはっきり見え、微生物や破片が寒天表面に落ちて汚染されないようにすることができます。皿を梱包に戻し、アルミホイルで覆い、テープを包装してください。梱包されたプレートに、内容と準備日を記入してください。プレートは最大2ヶ月間保管することができ、それ以降はプレートを廃棄する必要があります。