Hoechst染色のプロトコル

Hoechst染色は、蛍光顕微鏡とフローサイトメトリー技術によってDNAとRNAを標識するために使用される蛍光色素です。
Hoechst 33258およびHoechst 33342は、これらのシミの中で最も使用されています。それらはDNA分子に結合する能力を有し、核およびミトコンドリアを紫外線下で蛍光を発するようにさせる。 Hoechst染色は、Hoechst 33258およびHoechst 33342の両方を使用する細胞染色技術を含む、生物工学および遺伝学の研究室で一般的に行われています。Hoechst 33342 HSC染色および幹細胞精製プロトコール

このプロトコールは、マウス骨髄からの細胞。
技術者は、HBSS +塩溶液、HEPES緩衝液およびウシ胎仔血清を用いて骨髄サンプルを調製する。それらは溶液を回転させ、予熱したDMEM培地に加える。 Hoechst染色液を加える。このソリューションは、正確に90分間、華氏98.6度の水槽に置かれ、ピッツバーグ大学の免疫学科に報告されています。 Hoechst 33342 DNA染色

このプロトコール中、技術者はHoechst 33342染色を蒸留水に懸濁し、2％ウシ胎児血清を添加して緩衝液の助けを借りてpHを7.2に維持した。
その後、細胞を98.6°Fで1時間インキュベートし、すぐにサイトメーターと呼ばれる機器で分析する。

染色されたDNAは、ミシガン大学健康システムによると、


DNA結合蛍光色素Hoechst 33258を用いたDNA検出


このプロトコルでは、分光光度計と呼ばれる装置を使用して、DNAとRNAセグメントを分析しました。技術者は、Hoechst33258作業溶液および子牛胸腺DNAサンプルを使用する。彼らはまた、DNAサンプルと臭化エチジウムと呼ばれる化学物質を使って分離した溶液を作ります。
その後、CytometryのCurrent Protocolsによると、両方の培地で細胞染色結果を分光光度計を用いて比較します。