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TMREプロトコル

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テトラメチルローダミンエチル(TMRE)は、MitoPT™で使用されている「遅い、親油性の、カチオン性の蛍光再分配染料」である。
ImmunoChemistry Technologies、LLCによって製造されたTMRE /TMRMミトコンドリア膜電位アセスメントキット。このプロセスは、細胞内の膜貫通電位勾配を見るのに役立つ。アッセイの準備

プロトコルは簡単で、摂氏37度で処理するのに約20分かかります。アッセイに使用される生きている細胞は、使用の準備に数時間から数日間かかります。コントロール細胞は、アポトーシスを起こすために誘導される必要があるため、調製するのに数時間かかることがある。





細胞をアポトーシスに最適な密度に培養するあなたの特定の誘導プロトコルによるが、10(6)細胞/mLを超えてはならない酸化ストレス誘導。


Protocol Part 2

同じ誘導された集団と同じ密度で、非誘導陰性対照細胞集団を培養する。



Protocol Part 3

以下のミトコンドリアをアポトーシスまたは意図的に脱分極させるあなたの望むプロトコル。



パート4

1Xアッセイ/洗浄バッファーを調製する


プロトコルパート5〜8

1 mMまたは0.2mMのMitoPT™ TMRE /TMRM在庫あり。プロトコルパート6では、1mMの1:100希釈液、または0.2mMのMitoPT™ TMRE /TMRM溶液を使用して、細胞培養サンプルにスパイキングした。プロトコルパート7では、最終20〜200nM濃度のMitoPT™ TMRE /TMRMソリューション。

プロトコルパート8では、データを分析します。



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