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PBMC Protocol

     編集:病気

凍結保存された末梢血単核細胞(PBMC)は、免疫療法およびワクチンに対する応答を含む研究のための標本の頻繁な供給源である。
いくつかのプロトコールは、プロセスの単離および凍結段階に限定されるが、他のプロトコールは解凍手順を含む。単離手順および凍結手順
分離を促進する市販の化合物を各50mL遠心分離管に入れ、管を30秒間遠心分離する。開封前に血液チューブの栓にアルコールを吹き付けた後、抗凝固剤で処理した全血をピペットで遠心チューブに移す。血液の血漿層をピペットで吸引する



前のステップの細胞を緩衝生理食塩水で3回遠心分離します。細胞計数後、標本を遠心分離し、次いで凍結培地に懸濁させる。凍結培地中の検体は、次に、クライオバイアル間で1mLの量で分割される。
バイアルは、

-70℃の冷凍庫に一晩保存され、翌日液体窒素中で長期保存に移行します。


安全な解凍

クリオバイアルを液体窒素から37℃の水浴に移し、試料を1〜2分間解凍させる。暖かい輸送媒体を各バイアルに加える。希釈した細胞懸濁液を7分間遠心分離する。細胞の数と細胞生存率がチェックされ、細胞が濃縮する必要がある場合、検体はさらに7分間遠心分離されます。サンプルを作業溶液に希釈し、指定されたプロトコールで試験を開始する前に12〜18時間休息する。





バイオメッドセントラル:分離のためのプロトコール、凍結保存およびPBMCの凍結

糖尿病の膵臓臓器ドナーのためのネットワーク:末梢血単核細胞(PBMC)の分離




Los Almos National Labs:抗体アッセイPBMCにおける
科学者の解決策:全血からリンパ球を単離する。


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